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RTScript All-in-One 1st-Strand cDNA Synthesis Kit

RTScript All-in-One 1st-Strand cDNA Synthesis Kit

產品編號:RTR2103-01

產品規(guī)格:50次

數量
價格 ¥600


RTScript All-in-One 1st-Strand cDNA Synthesis Kit

●  產品貨號及規(guī)格:

貨號

包裝

貯存

RTR2103-01

50×20μl

-20

●  產品組成:

組成

包裝

5×RTScript 1st Strand cDNA Synthesis MasterMix

200 μl

gDNA Remover

50 μl

10×gDNA Remover Buffer

100 μl

RNase-free H2O

1 ml

●  產品簡介:

本試劑盒含有反轉錄需要的全部試劑(RTScript MMLv Reverse Transcriptase,RNase Inhibitor,dNTP、反應 Buffer,Oligo (dT)18,Random primer),濃度為5×。進行RNA反轉錄反應時,只需加入模板和RNase Free H2O 即可高效合成第一鏈cDNA,大大簡化了操作過程、提高了效率、減少了操作過程中的人為誤差。本制品含有去基因組成分gDNA Remover,以RNA為模板進行cDNA第一鏈合成時,可以同步去除基因組DNA污染,與傳統(tǒng)DNaseI消化對比,gDNA Remover消化后無需加入EDTA進行失活;反應結束后,65℃加熱2分鐘,就可以不可逆失活。具有快速簡便、重復性高、特異性好、靈敏度高和穩(wěn)定性好的特點。該試劑盒采用的反轉錄酶去除了 RNase H活性,從而避免反轉錄過程中降解RNA。 同時經過突變文庫篩選,使得其熱穩(wěn)定性更強,可耐受50℃高溫反應。相比于低溫條件下反轉錄反應,采用高溫反轉錄可顯著打開 RNA二級結構,從而提高復雜 RNA 模板的擴增性能、提高反轉錄 cDNA的長度(可以獲得12 kb cDNA)和產量,從而提高后續(xù)檢測的靈敏度。合成的第一鏈 cDNA可廣泛用于 2nd Strand 的合成、 雜交、 PCR擴增、Real-Time PCR 反應等。

●  貯存和運輸:

開封后-20℃貯存兩年;濕冰運輸。

●  使用方法:

. 去除基因組DNA污染:

1.1冰上配制如下體系:

組份

加入體積

Total RNA/mRNA

100ng-2μg(8 μl)

gDNA Remover

1μl

10×gDNA Remover Buffer

1 μl

RNase-free H2O

up to 10 μl

1.2輕柔混勻,快甩離心,37處理 2 min,去除基因組污染,冰上放置。

注:若RNA中基因組DNA污染嚴重,可以延長37℃處理5 min。

1.3 65℃處理2 min,失活gDNA Remover,冰上放置。

. 第一鏈cDNA合成(反轉錄反應)

2.1冰上配制如下體系:

組份

加入體積

步驟1中的反應液

10 μl

5×RTScript 1st Strand cDNA Synthesis MasterMix

4 μl

RNase-free H2O

6 μl

2.2 反轉錄:輕柔混勻,快甩離心; 50℃孵育15 min,

2.3 終止反應:85℃孵育 5 min,終止反應。

反應產物可直接用于 PCR,如果不立即使用,-20℃ 保存,長時間保存建議-80℃ 放置。

●  注意事項:

    5×RTScript 1st Strand cDNA Synthesis MasterMix中已經包含Oligo (dT)18和Random primer,不僅適用于包含poly(A)結構的真核生物mRNA,也適用于不含poly(A)結構的原核生物RNA,真核生物rRNA和tRNA等模板,但不適用于miRNA等小RNA模板。


引用RTR2103 RTScript All-in-One 1st-Strand cDNA Synthesis Kit發(fā)表文章

使用該產品發(fā)表部分文章列表:

1. [2025 IF=12.4] Oxygen-supplemented organic matter significantly enhanced microbial antimony mobility in hydrologically dynamic groundwater of a typical mining area.

Author: Weiqi Wang, Xuan Qiu, Min Li, Xinyue Zhang, Xiaoyan Li, Yang Li, Jingwen Lei, Olli H. Tuovinen, Hongmei Wang

Journal: Water Research Accepted date: 3 July 2025

Institution:State Key Laboratory of Geomicrobiology and Environmental Change, China University of Geosciences

Paper linkhttps://doi.org/10.1016/j.watres.2025.124159


 
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