購買前先必讀
非變性蛋白電泳Marker轉(zhuǎn)膜問題
http://www.99xxw.com/news_detail.aspx?NewsID=248
非變性電泳蛋白質(zhì)Marker（45-880
kD）
Native
Electrophoresis Protein Marker（45-880 kD）
●產(chǎn)品編號及規(guī)格：
RTD6137 20次 100
μl
●儲存及運輸條件：
-20℃保存，濕冰運輸，有效期為12個月。
● 產(chǎn)品簡介：
本產(chǎn)品有4種蛋白組成，分子量范圍為45-880
kD，經(jīng)過非變性電泳后，用考馬斯亮藍(lán)染色后可以得到5條主帶。
|
蛋白名稱
|
分子量(kD)
|
蛋白來源
|
pI
|
說明
|
|
Ferritin
|
440
880
|
equine
spleen
|
N/A
|
非變性下440kD和880
kD
|
|
Carbonic
Anhydrase
|
300
|
Bovine
Erythrocytes
|
6.4
|
單體分子量29kD，非變性下為多聚體，表現(xiàn)為多種電荷異構(gòu)體（charge
isomer）
|
|
Albumin
|
66
|
bovine
serum
|
4.6-5.8
|
球蛋白，單體分子量66
kD，非變性下可形成少量二聚體
|
|
Ovalbumin
|
45
|
egg
white
|
4.71或
4.59
|
球蛋白，分子量為45kD，非變性條件下大于45kD會出現(xiàn)電荷異構(gòu)體（charge
isomer）
|
● 使用說明：
1. 取出產(chǎn)品后，常溫融化后，徹底混勻，上樣電泳。
注：上樣量根據(jù)膠的厚度和梳子的寬度確定。一般說來，1.0厚度10齒梳子加樣孔上樣5 μl，1.0厚度15齒梳子加樣孔上樣量2.5 μl，其他規(guī)格梳子請適當(dāng)調(diào)整上樣量。
2. 該產(chǎn)品不含蛋白凝膠制備試劑，您可以選擇非變性PAGE凝膠制備及電泳試劑盒（貨號：RTD6130）或者蛋白預(yù)制膠（貨號RTD6118）。如自備試劑，經(jīng)典Laemmli系統(tǒng)中把制膠溶液、電泳緩沖液和上樣緩沖液中的SDS和還原劑（DTT或β-巰基乙醇）全部去除即可進(jìn)行非變性電泳。
3. 電泳條件：
建議使用8%非變性等度膠或者4-15%非變性梯度膠進(jìn)行電泳。
|
恒電壓
|
150-200 V
|
|
起始電流
|
27-35 mA/板膠
|
|
結(jié)束電流
|
7-10 mA/板膠
|
|
電泳時間
|
50-80min+
|
4. 電泳結(jié)束后，考馬斯亮藍(lán)染色，觀察結(jié)果。
注：使用銀染染色時，由于靈敏度高于考馬斯亮藍(lán)染色方法，需要適當(dāng)降低Marker上樣量，一般稀釋50倍后上樣。
注意：
1.本蛋白Marker不適用于變性蛋白電泳(SDS-PAGE)。
2. 蛋白非變性電泳條件下，不能精確判斷蛋白的分子量大小。因為在非變性條件下，蛋白的電荷，空間結(jié)構(gòu)，物化性質(zhì)等都對蛋白的遷移有影響。
3.非變性蛋白電泳Marker（RTD6137，RTD6142，RTD6144）由于要保持蛋白的天然結(jié)構(gòu)，都沒有偶聯(lián)染料，在電泳時基本都看不到條帶；然而，RTD6137和RTD6144中的440 kD和880 kD由于天然蛋白中含有鐵離子，使得電泳后在膠上可見淡黃色，其中440 kD顏色更深。凝膠轉(zhuǎn)膜后，膜上也可以看到黃色的440 kD條帶，可以大體判斷Marker轉(zhuǎn)膜的效果。
4. 非變性Marker轉(zhuǎn)膜后可以后用麗春紅染色液（貨號：RTD6301）染膜，可以看到Marker條帶，順便可以檢測轉(zhuǎn)膜效率，然而要注意的是麗春紅染色靈敏度比較低，可能不能完全看到完整的Marker條帶。
● 實驗示例：
使用RTD6137非變性電泳蛋白質(zhì)Marker（45-880
kD）產(chǎn)品發(fā)表部分文章列表：
1.
[2022 IF=8.0] Tektin bundle interacting protein, TEKTIP1,
functions to stabilize the tektin bundle and axoneme in mouse sperm flagella
Author: Xin?Yan Geng,Hui?Juan Jin,
Lan Xia.Bin?Bin Wang,Su?Ren Chen
Marker: RTD6137非變性電泳蛋白質(zhì)Marker（45-880 kD）
Journal: Cellular and Molecular Life Sciences (2024)
81:118
Institution: Beijing
Normal University
Paper link：https://doi.org/10.1007/s00018-023-05081-3
2.
[2023 IF=5.7] Biochemical Characterization and Mechanism
of Thermostability of the Thermophilic Hyaluronate Lyase TcHly8D.
Author: Yuzhu Zhang,Hao Wu,Zheng Fu, Shilong Zhang,
Meiling Zheng, Jiaxia Sun, Zhongxia Lu, Rilei Yu,Wengong Yu, and Feng Han
Marker: RTD6137非變性電泳蛋白質(zhì)Marker（45-880 kD）
Journal: J. Agric. Food Chem. 2025，73，6，3521-3535
Institution: School
of Medicine and Pharmacy, Ocean University of China
Paper link：https://doi.org/10.1021/acs.jafc.4c09901
